近日,EON体育4平台楊立桃教授課題組🧧,創新開發了一種適合於新冠病毒快速、超靈敏的等溫檢測方法👇,命名為OPERATOR。相關研究論文“An ultra-sensitive one-pot RNA-templated DNA ligation rolling circle amplification-assisted CRISPR/Cas12a detector assay for rapid detection of SARS-CoV-2”在生物傳感器權威期刊《Biosensors and Bioelectronics》發表🧑🏻🔧。該研究開發了一種適合於新型冠狀病毒的一鍋式快速檢測方法🧖🏽♀️。EON体育4平台博士研究生朱早兵為本文的第一作者,EON体育4平台楊立桃教授為通訊作者。
新型冠狀病毒(SARS-CoV-2)爆發以來🚣🏽♂️,在全球範圍內感染了數億人,奪去了數百萬人的生命🤷🏽♂️,對全球公共衛生和社會經濟活動造成巨大影響🤞🏻。目前👱,新型冠狀病毒的臨床診斷方法,主要是逆轉錄熒光定量PCR法(RT-qPCR)和免疫試紙條學。RT-qPCR法需要昂貴的儀器設備且檢測周期較長,難以滿足快速👳🏼♂️、便攜♟、在線檢測的需求。本研究從頭設計了針對RNA病毒的RNA分子信號轉換、等溫擴增和信號放大識別模式,開發了一種RNA分子免逆轉錄的一鍋式滾環擴增技術輔助的CRISPR/Cas12a檢測方法(OPERATOR,原理如圖1所示)。OPERATOR成功將靶標-鎖匙探針連接🤳🏼🧏🏻、多重擴增、CRISPR/FnCa12a體外剪切多部反應整合到單管一步反應,實現了環化、擴增以及剪切的一體化。
圖1 OPERATOR工作原理示意圖
優化建立的OPERATOR技術具有特異性強🧝🏽♂️、靈敏度高🎧、反應速度快等優點。在此基礎上😜,本研究針對SARS-CoV-2建立了其特異性檢測方法,靈敏度達到了1.625拷貝/反應,臨床樣本的檢測準確性與RT-qPCR檢測相當🧑🏿💻。同時,本研究將OPERATOR與免疫層析技術相結合,建立了一套可視化的現場檢測系統,實現了從樣本采集👥、核酸提取和檢測的現場檢測,檢測時間約為40分鐘。後期,團隊將進一步基於OPERATOR技術開發呼吸道常見病毒的多重檢測𓀈、分型等方法和產品,也將該方法應用於更多的致病性病毒病原體的分子檢測。
該研究得到了上海市科學技術委員會農業研究基金和上海高校特聘教授(東方學者)項目經費的支持。該研究還得到了廣州醫科大學第一附屬醫院廣州呼吸健康研究所楊子峰研究員🔐、碩世生物🧻、珠海輝瑞公司🐓、上海市計量測試技術研究院(SIMT)等的大力支持。
論文鏈接👯♀️:
https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0956566323001215